企业等级: | 普通会员 |
经营模式: | 生产加工 |
所在地区: | 湖北 武汉 |
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刘经理 先生
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手机号码: | 18317038349 |
公司官网: | www.biomisp.com |
公司地址: | 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新四路40号18栋304室 |
发布时间:2020-07-14 23:54:42
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家***从事生物***技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。原位杂交技术发展史原位杂交技术(Insituhybridization,ISH)是由分子生物学、***化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向***提供的生物技术服务。
网上有很多关于FISH的实验步骤教程,但每个探针盒子的操作可能存在差异。懂了原理,才能以不变应万变。
FISH的大致步骤分为探针变性、标本变性、杂交、洗脱、杂交信号放大(适用于适用生物素标记的探针)、复染、封片、荧光显微镜观察FISH结果。
石蜡切片的FISH要点
(1)***固定,采用PH7.2的10%甲醛固定24h是比较适合的,PH很重要。较厚的***块建议切开后再固定。这一点小编已经反复提过很多次了。良好的固定是所有病理实验的前提。
(2)对于石蜡切片来说,采用蛋白酶K作为消化液是更优的选择。消化条件20g/L蛋白酶K在50℃下消化20min。胃蛋白酶是极易失活的,失活了就没法充分消化,消化过度又会使细胞核变模糊。综合来看,小编更推荐蛋白酶K。
(3)石蜡切片的杂交温度一般都是37摄氏度。而杂交时间则需要摸索才能得到更佳时间。不过,一般的过夜孵育基本可以达到目的。
(4)FISH实验中非特异性着色是个难以避免的问题,我们能做的就是尽量减少背景。具体可作为的地方:充分严格漂洗、全程避免干片、探针浓度不宜太高、杂交温度要控制在37℃。
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